關(guān)于293/293T細(xì)胞

1、種屬都為人，不是鼠。

2、來(lái)源：293細(xì)胞是轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞系，293T細(xì)胞由293細(xì)胞派生，同時(shí)表達(dá)SV40大T抗原，含有SV40復(fù)制起始點(diǎn)與啟動(dòng)子區(qū)的質(zhì)粒可以復(fù)制。用Ca3(PO4)2轉(zhuǎn)染效率可高達(dá)50%。蛋白表達(dá)水平高，轉(zhuǎn)染后2-3天用堿性磷酸酶分析可較容易地檢測(cè)到表達(dá)的蛋白。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞是過(guò)表達(dá)蛋白并獲得細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。

3、形態(tài)為上皮細(xì)胞，能致瘤。

4、染色體核型：亞三倍體人細(xì)胞系。染色體眾數(shù)為64，30%的細(xì)胞有64 條染色體。4.2%的細(xì)胞染色體數(shù)目更多。多數(shù)細(xì)胞der(1)t(1;15) (q42;q13), der(19)t(3;19) (q12;q13), der(12)t(8;12) (q22;p13),還有四條標(biāo)記染色體，有的細(xì)胞另有5條標(biāo)記染色體。der(1)與M8 (or Xq+)常常成對(duì)出現(xiàn)。N17 與 N22各有四條。值得注意的是多數(shù)細(xì)胞有三條X染色體，兩條Xq+，一條Xp+。

5、是貼壁細(xì)胞。

6、293:棄培養(yǎng)基，含0.25% 胰酶, 0.03% EDTA 消化液洗滌，棄去，加1-2ml消化液室溫或37℃消化。加入新鮮培養(yǎng)基，吸出，分到新培養(yǎng)皿中。一傳二至一傳四。293T:生長(zhǎng)快，通常倍增時(shí)間不到一天 。每3~4 天1：10至1：20稀釋，5% CO2條件下培養(yǎng)。細(xì)胞貼壁疏松，可只用EDTA消化，不要用胰蛋白酶過(guò)度消化。每?jī)傻饺鞊Q液一次。

7、凍存液：95%培養(yǎng)基;5%,DMSO;

8、培養(yǎng)條件：ATCC培養(yǎng)基：90%的MEM Eagle，加入2mM L-谷氨酰胺，1.5g/L碳酸氫鈉，0.1 mM必需氨基酸，1.0 mM 丙酮酸鈉;10%加熱滅活的馬血清37℃培養(yǎng).

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